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心脏细胞清洗(人体心脏细胞)

心脏病 2025-09-29 11:29心脏病www.xinxueguanw.cn

1. 组织预处理

  • 心脏组织需先用PBS缓冲液反复冲洗，去除血液残留和杂质
  • 建议在4℃低温环境下操作，以减少细胞损伤

    • 2. 酶解消化

  • 常用0.1-0.2%胶原酶与0.05-0.1%胰蛋白酶混合消化液
  • 需配合DNA酶(0.01%)使用，防止细胞粘连
  • 采用37℃间歇振荡消化(每次15-20分钟)可提高细胞存活率

    • 3. 梯度离心纯化

  • 300-500×g离心5-10分钟沉淀细胞
  • 通过差速贴壁法分离心肌细胞与成纤维细胞

    • 4. 洗涤步骤

  • 使用含胎牛血清(FBS)的培养基终止酶反应
  • 需重复离心洗涤3-4次直至上清液澄清

    • 注意事项：

  • 成人心肌细胞对钙离子敏感，洗涤液需含适量钙离子稳定剂
  • 原代细胞存活率通常低于50%，需快速完成后续培养

    • 技术进展：

  • 水凝胶微球封装技术可提升干细胞分化为心肌细胞的效率

    • - 脱细胞心脏支架技术为细胞重编程提供新型培养载体

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